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細胞毒T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4)

ELISA試劑盒--適用于血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途) 

現(xiàn)價:0
貨號:F00500
規(guī)格: 48T96T
類型: 試劑盒
說明書下載

產(chǎn)品參數(shù)

靈敏度

30ng/ml

檢測范圍

62.5→4000ng/ml

穩(wěn)定性

在4℃條件下,產(chǎn)品保存6個月



準備試劑與收集標本

1.  10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。

2.  收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反復(fù)凍融。

3.  標準品液配制:取8個1.5ml離心管,第一管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在第一管中加入標準品溶液100ul置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。

     如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。

4.  洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)。


檢測程序

1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃40分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。

3.  每孔加入蒸餾水和第一抗體工作液各50ul(空白除外)。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃20分鐘。

4.  洗板:同前。            

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃10分鐘。

6.  洗板:同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。

8.  每孔加入100ul終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。


結(jié)果計算與判斷

1.  所有OD值建議減除空白值后再行計算。如空白OD低于0.1,也可以直接計算。

2.  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,使用軟件作圖,畫出標準曲線。

3.  根據(jù)樣品OD值計算出相應(yīng)含量即可。繪圖軟件可在本網(wǎng)站技術(shù)資訊下載或向本公司郵件索取。


注意事項

1.   以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。

2.   洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高。

3.   檢測時所有試劑都要恢復(fù)到室溫。板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。

4.   試劑盒使用超敏TMB溶液,若顯色過深會出現(xiàn)絮狀物,屬正常現(xiàn)象,不影響結(jié)果判讀。

5.   說明書中試劑盒組成為96T的量,48T的量應(yīng)減半!

6.   本試劑盒宜置4oC冰箱保存。僅用于科研,不能用于臨床診斷!


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